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TNFR2(TNFR1 KO) Effector Reporter Cell

CBP74539

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I. Background
      TNFR2(腫瘤壞死因子受體2,TNFRSF1B 或者CD120b)是腫瘤壞死因子受體超家族的重要成員,主要與配體TNF-α結(jié)合發(fā)揮作用。與幾乎在所有細胞上均有表達的TNFR1 不同,TNFR2 的表達具有高度的細胞特異性,其主要高表達于調(diào)節(jié)性T 細胞(Tregs)、髓源性抑制細胞(MDSCs)等免疫抑制細胞表面,同時在部分腫瘤細胞、活化的效應T 細胞及內(nèi)皮細胞上也可被誘導表達。TNFR2 胞內(nèi)段缺乏“死亡結(jié)構(gòu)域”,因此不直接介導細胞 凋亡,而是成為免疫系統(tǒng)中的調(diào)節(jié)中樞。在疾病方面,TNFR2 扮演著對立統(tǒng)一的角色:一方面,其信號缺陷與類風濕關(guān)節(jié)炎、炎癥性腸病等自身免疫病相關(guān);另一方面,在多種癌癥(如肺癌、乳腺癌、食管癌)中,TNFR2 的高表達常提示不良預后,它可幫助腫瘤構(gòu)建免疫抑制微環(huán)境、促進腫瘤生長和免疫逃逸。

      TNFR2 主要通過募集TRAF2 等銜接蛋白,激活下游多條信號通路來發(fā)揮功能。其核心機制包括:激活NF-κB 通路(包括經(jīng)典和非經(jīng)典途徑),促進細胞存活、增殖及炎癥相關(guān)基因的表達;激活PI3K-Akt 通路,保護細胞免受凋亡,維持細胞生長;激活MAPK 通 路,參與調(diào)節(jié)細胞增殖和分化。TNFR2 信號可顯著促進Tregs 的激活、擴增及其免疫抑制功能,同時也能激活MDSCs,從而維持免疫耐受和組織穩(wěn)態(tài)。在腫瘤微環(huán)境中,TNFR2 一方面直接通過上述存活通路促進腫瘤細胞自身增殖和抵抗凋亡,另一方面通過擴增Tregs 和MDSCs建立免疫抑制屏障,抑制效應T 細胞的抗腫瘤反應。
 
II. Description
       TNFR2(TNFR1 KO)Effector Reporter Cell 報告基因藥靶模型很好的模擬了體內(nèi)TNFR2 的信號轉(zhuǎn)導過程,原理見下圖所示。



Figure 1. TNFR2(TNFR1 KO) Effector Reporter Cell 細胞模型原理圖
 
III. Introduction
Expressed gene: TNFR2
Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: RPMI-1640+10%FBS+800 μg/ml Hygromycin B+1 μg/ml Puromycin
Mycoplasma Testing: Negative
Storage: Liquid nitrogen
Application(s): Functional(Report Gene) Assay
 
IV. Representative Data


Figure 2. Sanger of TNFR2(TNFR1 KO)  Effector Reporter Cell.

Figure 3. Recombinant TNFR2(TNFR1 KO)  Effector Reporter Cell stably expressing TNFR2.


Figure 4. Dose Response of TNFR2 Agonist Ab in TNFR2(TNFR1 KO) Effector Reporter Cell(C64).


Figure 5. Dose Response of TNFR2 Agonist Ab in TNFR2(TNFR1 KO) Effector Reporter Cell(C64).


Figure 6. Blocking of TNFα induced TNFR2( TNFR1 KO) Effector Reporter Cell(C64) Activity by TNFα Neutralization Abs with Membrane Anchored TNFα Cell(Adherent, C12).


Figure 7. Blocking of TNFα induced TNFR2(TNFR1 KO) Effector Reporter Cell( C64) Activity by TNFR2 Blocking Ab with Membrane Anchored TNFα Cell ( Adherent, C12).

 

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